牛粘膜肝素与肝素猪粘膜在USP力量调整水平
沃尔特Jeske
1
*,
艾哈迈德Kouta1,Ambar Farooqui1,Fakiha西迪基1,Varun Rangnekar2,Manoj Niverthi2,Rajan Laddu2,黛布拉Hoppensteadt1,俄梅珥伊克巴尔1,珍妮Walenga1和喋喋不休法里德·1
- 1心血管研究所,芝加哥洛约拉大学健康科学部门,梅伍德,美国
- 2格鲁吉亚血栓论坛,Suwanee,乔治亚州,美国
作品简介:牛粘膜肝素(BMH)目前正在开发re-introduction医疗和手术适应症。BMH活性药物成分(API)展品有点弱USP力量相比,效益。我们假设当剂量归一化基于USP参考肝素、BMH将展示具有可比性在体外和在活的有机体内那些效益产生的影响。因此,研究开发比较api的牛和猪的肝素。
材料与方法:API版本的效益得到从克理索实验室(富兰克林,哦)和Medefil(格伦艾伦,IL)。API版本的BMH亲属获得大师(帕苏风杜、巴西)。这些为他们的分子量肝素是化验资料,亲和力,USP效力和抗凝/ antiprotease概要文件使用标准的实验室方法。在体外鱼精蛋白中和进行了研究。抗血栓和出血效果测定在灵长类动物的老鼠和药效学资料评估。
结果:尺寸排阻色谱法证明了BMH ~ 15%的平均分子量高于效益(BMH: 20.1±0.8 kDa, PMH: 17.5±0.7 kDa)。BMH展出anti-Xa效力的130 U / mg虽然PMH anti-Xa效力了185 U /毫克。抗凝和antiprotease化验、BMH表现出较低的功能是与USP力量成正比。当BMH与PMH在力量调整浓度相比,它显示相同的量效曲线aPTT和anti-protease化验。然而,在鱼精蛋白中和研究、BMH要求稍高的鱼精蛋白与效益。BMH和效益管理的老鼠在等效anti-Xa单位剂量导致类似的抗血栓形成的活动和出血时间延长。类似的药效学资料观察灵长类动物当BMH PMH anti-Xa U /公斤基础上服用。
结论:BMH,使用时按可比anti-Xa单元水平与效益,然而,它需要按比例更高数量的鱼精蛋白由于增加了适应质量更高的效力。额外的结构特征,研究和PF4的交互在活的有机体内中和研究正在进行。
介绍
肝素钠产品长期以来一直用于治疗血栓性疾病的(1)。全球肝素市场大约是每年70亿美元,一半以上的市场组成的低分子量肝素(流明瓦)(2)。即使新抗凝血剂的出现,预计,在可预见的未来肝素和流明瓦肝素将保持标准的临床治疗和也是一个必不可少的组成部分成功的手术和介入过程(1)。
肝素可以在商业数量从肠道粘膜(牛、猪、羊)和肺(牛)。目前,猪粘膜肝素是主要的全球肝素的原料来源,和唯一来源最广泛使用的流明瓦肝素。十年前,肝素污染危机后,认识到大部分的全球供应猪的肝素源于一个国家(3从监管机构),有兴趣扩大肝素的来源(4)。门完成这将意味着之一的肝素来自牛的组织(5)。
肝素来自不同的组织和/或物种已被证明有不同的程度的硫酸盐化作用和乙酰化作用,分子量和抗凝活性(6- - - - - -9)。肝素的化学条件孤立也会导致结构修改和改变了最终产品的功能特性(10)。先前的研究已经证明了依诺绵羊的相似性和猪肝素的结构和活动(11,12)。结构上的差异和功能之间的相关性差异并不完全清楚。然而,众所周知,具体活动的牛和猪肝素的anti-Xa和anti-IIa活动是相当不同的。牛肝素通常是30 - 50%的效力低于猪提取肝素钠(13)。这种差异在活动可能使这些药物的剂量,可能会限制医生的能力交换不同的肝素。
一直在努力开发牛肝素制剂,更类似于猪的肝素。一个这样的尝试已经治疗牛肠肝素与各种sulfotransferases增加6度和/或3点硫酸盐化作用(13)。这样修改后的肝素已被证明有一个数量的增加抗凝血酶结合位点和anti-Xa anti-IIa活动。其他研究已经表明,通过离子交换色谱法可以生产牛肝素分数富含6 -硫酸盐化作用表现出增强的抗凝活动(14)。
早期的研究利用老鼠腔caval血栓形成模型(15)或接受血液透析的患者临床端点(16)已经证明,基于肝素剂量国际单位相同的端点。目前的研究比较了生物活动均等的猪和牛肝素的浓度或剂量根据USP anti-Xa效力。
材料和方法
测试代理
本研究利用多个大量肝素来自猪肠道粘膜(克理索实验室、富兰克林、哦、Medefil格伦艾伦,IL)和牛肠粘膜(亲属主工业Quimicas,帕苏风杜,巴西)。研究了肝素钠样品粉末存储在室温下干燥。这些样品是承压梅特勒的平衡和0.9%氯化钠被用作稀释剂使股票的解决方案在活的有机体内和在体外测试。
在体外研究
分子量决定了用凝胶渗透色谱法(GPC)的高效液相色谱法(HPLC)系统之前报道(17)。简单地说,使用刚脱气系统平衡流动相(0.3硫酸钠),直到一个稳定的基线。样品分析是由注射20μl(10毫克/毫升0.3硫酸钠;pH = 5.0)上衔接着有关啧啧G2000SW和啧啧G3000SW列(Tosoh生物科学、东京、日本)。流动相的流速为0.5毫升/分钟和每个示例的运行时间是65分钟。国际扶轮的内部温度探测器被设定为35°C和紫外线决心在205海里。所有分析都是在室温下。每个样本的洗脱剖面进行了分析与校正曲线准备使用13不等分子量肝素分数从3.0到40 kDa。分子量概要文件包括体重平均分子量、等参数数量平均分子量和分子量分布。寡糖链的分数与分子量<分裂到8 - 16个kDa 8 kDa, 16 kDa > 24 kDa测定从切片表为每个样本准备使用年软件(水域,米尔福德,MA)。
猪和牛肝素补充正常的人类血浆浓度范围的0.625到10μg /毫升或0.0625到1 anti-Xa U /毫升。补充血浆样本化验aPTT和anti-Xa anti-IIa活动。aPTT测量用TriniClot试剂(Tcoag、威克洛郡、爱尔兰)(18)在ACL精英仪表(Werfen,贝德福德,MA)。Anti-Xa anti-IIa活动确定使用内部amidolytic化验ACL精英(19)。anti-Xa化验,牛因素Xa(酶研究实验室,南本德)在50 mM三羟甲基氨基甲烷缓冲液稀释(pH = 8.4) 1.25国际单位/毫升的浓度。Spectrozyme Xa(基于诊断,温莎,新斯科舍省,加拿大)重组在无菌水2.5毫米的解决方案。ACL精英编移液管10μl Xa方案转化为等离子体和100μl因素反应转子。样本孵化之前的300年代的75μl Spectrozyme Xa。光密度在405纳米测量30年代。anti-IIa化验,人类凝血酶(酶研究实验室,南本德)在50 mM三羟甲基氨基甲烷缓冲液稀释(pH = 8.4) 5 U /毫升的浓度。Spectrozyme花絮(基于诊断,温莎,新斯科舍省,加拿大)重组在无菌水1毫米的解决方案。ACL精英编移液管10μl等离子体和100μl凝血酶解反应转子。样本孵化为120年代之前的40μl Spectrozyme花絮。 Optical density at 405 nm was measured for 30 s.
Anti-Xa和anti-IIa效能评估利用Aniara amidolytic化验(西切斯特,哦)。硫酸鱼精蛋白获得了从σ(圣路易斯,密苏里州)。
在活的有机体内研究
所有的动物依法被安置指导实验室动物保健和使用的(20.)。本研究按照建议进行芝加哥洛约拉大学健康科学部门,机构的动物保健和使用委员会(IACUC)。IACUC批准的协议。
大鼠模型
大鼠颈静脉压模型被用来评估抗血栓形成的活动(21)。一批牛和猪在剂量肝素进行了测试,从125年到1000年μg /公斤和50到150 anti-Xa U /公斤。6每个治疗组大鼠进行评估。之后,一度达到足够的麻醉平面的肌内剂量氯胺酮(90毫克/公斤)和甲苯噻嗪(10毫克/公斤),脖子上的皮肤被刮了。集中在了一个口子气管和右颈静脉是孤立的。基线血液流经血管评估使用双向多普勒探针。检测肝素,或0.9%氯化钠车辆,通过尾静脉注射。五分钟后,颈静脉使用蚊子钳手动阻挡。一分钟的阻塞后,钳被释放。血流量再次测量5分钟后释放的钳。 This procedure was repeated until the vessel had thrombosed as determined by no measurable blood flow 5 min after releasing the forceps. The effectiveness of the heparin treatment was quantified in terms of the number of clamping cycles required to cause vascular occlusion. Results are presented as mean ± SD.
出血性活动决心使用鼠尾出血模型(22)。一批牛和猪在剂量肝素进行了测试,从125年到1000年μg /公斤,从25到150 anti-Xa U /公斤。6每个治疗组大鼠进行评估。之后,一度达到足够的麻醉平面的肌内剂量氯胺酮(90毫克/公斤)和甲苯噻嗪(10毫克/公斤),检测肝素,或0.9%氯化钠车辆,通过尾静脉注射。五分钟后,出血是横断引起远端2毫米的鼠尾使用手术刀叶片。免费的血液从尾巴轻轻涂抹提示每隔30年代,小心不要破坏任何凝块,直到出血停止。出血时间是评估的时间(以秒为单位)从尾巴横断停止出血。结果平均数±标准差。
非人灵长类动物模型
恒河猴(解剖)范围从6.4到10.8公斤的体重被用于这项研究(23)。灵长类动物是由肌肉麻醉的克他命(10毫克/公斤)和甲苯噻嗪(1 - 2毫克/公斤)基于他们最近的重量。实现适当的麻醉深度(评估缺乏应对脚捏),灵长类动物被刚重准确地确定测试剂的剂量。手术房间被保持在环境温度为78°F的机会降到最低,灵长类动物将成为低温麻醉。一个基线血液样本被隐静脉静脉穿刺的收集。一批牛和猪的剂量肝素是管理0.5毫克/公斤或者100 anti-Xa U /公斤通过侧隐静脉静脉注射。额外的15岁就收集血液样本,30岁,60岁,120分钟post-drug管理。四个灵长类动物给每个肝素。
所有血液样本收集利用双重注射技术,采用21计蝴蝶针。在最初~ 1毫升体积(丢弃血)收集,注射器被改变和2.7毫升样本并放在一个包含0.3毫升3.2%柠檬酸钠管。柠檬酸盐血样离心机在1100 x g 15分钟。穷人浮在表面的血小板血浆收获和整除的等离子体存储冻结在−70°直到循环药物分析的水平。
在体外量效曲线是由补充牛和猪的肝素钠混合的灵长类动物血浆。等离子体浓度的各种肝素是策划与相应的光学密度因子Xa或因子活动花絮化验使用绘图软件,SigmaPlot Windows版本12.3 (Systat软件,圣何塞,CA)和最佳曲线。药物浓度在每一个灵长类动物血液样本的anti-Xa anti-IIa活动是由外推。血浆浓度时间曲线下的面积(AUC)从外推计算使用PKSolver血浆浓度®插件为Microsoft Excel软件(24)。所有结果平均数±标准差。
统计分析
统计分析进行了使用SigmaPlot窗户,版本12.3 (Systat软件,圣何塞,CA)。牛和猪的肝素之间的差异进行评估t以及如果数据是正态分布和Mann-Whitney测试如果数据不是正态分布。剂量,为牛和猪肝素量效曲线分析了双向方差分析其次是Holm-Sidak多重比较检验。p值≤0.05被认为是具有统计学意义。
结果
凝胶排阻的洗脱概要,凝胶渗透色谱法显示好的批次再现性的分子量。的牛肝素表现出比猪肝素分子量略大。重量平均分子量牛肝素平均为20.1±0.84 kDa vs 17.5±0.72 kDa猪肝素(p< 0.001)。数量平均分子量是数字,但不显著,降低猪牛肝素相比,肝素。多分散性值稍高一些的牛肝素相比,猪的肝素(1.338±0.018和1.198±0.025;p< 0.001)(图1)。图1 b显示低聚糖组件的平均分布在牛和猪的肝素样品。牛肝素寡糖链的比例和样品分子量> 24 kDa被观察到近两倍的比例与猪样本观察(29.6±3.1%和16.2±3.1%;p< 0.001,t以及)。
图1。分子量的牛和猪的肝素。牛的分子量概要文件(n= 16批次)和猪(n= 4批次)肝素被尺寸排阻色谱法评估。(一)牛肝素表现出更高的体重平均分子量和分子量分布相比,猪的肝素。结果平均数±标准差。(B)分数的寡糖链与分子量> 24 kDa高出近两倍的牛肝素相比,猪肝素样品(29.6±3.1%和16.2±3.1%;*p< 0.001,t以及)。
牛的力量——和porcine-derived肝素是评估相对于肝素USP参考标准化验使用amidolytic化验(图2)。猪的肝素表现出意味着anti-Xa和anti-IIa效能184.6±2.8,183.4±1.7 U /毫克,分别。牛肝素的效能显著降低为132.4±5.0,133.0±7.5,分别基于anti-Xa和anti-IIa活动(p= 0.003 anti-Xa和anti-IIa Mann-Whitney测试)。这个anti-Xa力量被用来调整剂量在后续研究。
图2。USP效力决定使用amidolytic anti-Xa anti-IIa化验。牛肝素时表现出~ 30%的效能,低于观察猪的肝素。结果平均数±标准差。
牛和猪肝素抗凝活性的评估使用aPTT, anti-Xa, anti-IIa化验后补充正常人类血浆浓度10μg /毫升或1 anti-Xa U /毫升。当牛和猪的肝素在equigravimetric补充浓度,牛肝素产生较弱的anti-Xa和anti-IIa猪相比,肝素的影响。令人惊讶的是,这种差异并没有反映在aPTT延长的牛和猪的肝素(数字3得了)。当肝素的基础上补充而不是anti-Xa单位活动,的量效曲线amidolytic anti-Xa anti-IIa化验,牛和猪的肝素几乎重合(数字3 d-f)。
图3。猪和牛肝素的抗凝和antiprotease活动时补充人血浆。牛(n= 16批次)和猪(n= 4批次)补充人类血浆浓度从0.625到10μg /毫升(两者)或0.0625到1.0 anti-Xa U /毫升(D-F)。补充肝素血浆最小化活动牛和猪肝素之间的差异。结果平均数±标准差。*p< 0.001 PMH与BMH;* *p= 0.010 PMH vs BMH、双向方差分析。
Anti-Xa anti-IIa活动牛和猪的肝素浓度10μg /毫升浓度完全被固定的鱼精蛋白中和10μg /毫升(数据4 a、B)。相反,当肝素补充血浆anti-Xa U /毫升的浓度,有一个更高层次的残余牛肝素(不是中和)活动补充血浆样本(数据4 c, D)。
图4。在体外猪和牛的鱼精蛋白中和肝素anti-Xa来衡量的(A, C)和anti-IIa(B, D)化验。当肝素补充同等单位基础上等离子体(C, D)少,鱼精蛋白中和牛肝素。
牛和猪的肝素是动物管理评估的影响效力及其剂量的生物活动。颈静脉损伤的大鼠模型被选中来评估抗血栓形成的活动。符合其弱抗凝活性测量在体外,更少的颈静脉压周期被要求达到颈静脉阻塞大鼠接受更高剂量的牛肝素(图5)。剂量的1000μg /公斤,大鼠肝素治疗猪需要12.1±1.3比8.8±0.9夹夹紧牛heparin-treated老鼠(p< 0.001)。当肝素被管理的范围50到150 anti-Xa U /公斤,肝素是最小化之间的差异和牛heparin-treated动物表现出略高,但没有统计上的不同,抗血栓形成的活动相比,猪heparin-treated动物(图5 b)。类似的模式的活动时观察到延长出血时间的评估。在重量的基础上,服用后猪肝素产生统计上显著不再出血倍剂量测试相比,牛肝素治疗(图6)。当牛和猪的肝素在等效anti-Xa U /公斤的水平,给类似的出血时间拖长某个观察(图与肝素治疗6 b)。
图5。抗血栓形成的活动的牛和猪的肝素在大鼠模型。牛和猪被注射静脉注射组大鼠(n= 6 /剂量)在剂量范围从100年到1000年μg /公斤(一)或50到150 anti-Xa U /公斤(B)。*p< 0.001 PMH vs BMH、双向方差分析。
图6。牛和猪的肝素在大鼠出血性活动模型。牛和猪被注射静脉注射组大鼠(n= 6 /剂量)在剂量范围从100年到1000年μg /公斤(一)或25到200 anti-Xa U /公斤(B)。*p= 0.033,* *p= 0.016,#p< 0.001 PMH vs BMH、双向方差分析。
静脉注射肝素被管理的非人类的灵长类动物为了测量药效学的影响(图7)。多个血样收集在一段2 h post-administration和循环肝素浓度在U /毫升外推在体外anti-Xa和anti-IIa校准曲线。当肝素的剂量管理500μg /公斤,降低循环水平观察牛heparin-treated动物相比用猪的肝素治疗。峰值测量15分钟post-administration下降了大约30%比那些接受猪牛heparin-treated动物肝素。anti-Xa化验,峰值分别为1.53±0.12,2.2±0.1 U /毫升(p< 0.001),分别在牛和猪heparin-treated动物。类似的差异观察到当肝素水平测定anti-IIa活动(1.23±0.12,1.87±0.24 U /毫升(p< 0.001)分别在牛和猪heparin-treated动物)。当anti-Xa活动被用来确定等离子体浓度,auc的比率在牛和猪对灵长类动物是0.70(113.3±21.6和162.5±25.8 U *分* ml−1;p= 0.026),类似于anti-Xa效力的比例确定在体外。当anti-IIa活动被用来确定等离子体浓度,auc的比率更大的差异(比= 0.60)观察(95.4±6.9和157.9±27.8 U *分* ml−1;p= 0.005)。
图7。药效学的影响500μg /公斤肝素静脉注射剂量的牛和猪。牛和猪被注射静脉注射组的灵长类动物(n= 4 /肝素)。使用anti-Xa血浆肝素浓度决定(一)和anti-IIa(B)化验报告平均数±标准差。*p< 0.001,* *p= 0.003,#p= 0.006 PMH vs BMH、双向方差分析。
猪和牛肝素的浓度与时间曲线几乎重合浓度测量时使用anti-Xa或anti-IIa化验管理后剂量(图100 anti-Xa U /公斤8)。峰值为1.48±0.09,1.45±0.13 anti-Xa U /毫升观察牛porcine-treated动物,分别。anti-IIa化验,峰值为1.40±0.21,1.41±0.22 U /毫升观察牛porcine-treated动物,分别。AUC值决定使用循环药物水平基于anti-Xa anti-IIa活动也具有可比性。使用药物水平取决于anti-Xa化验,auc为牛和猪的肝素治疗动物被计算为111.5±11.0,108.8±26.7 U *分* ml−1,分别。使用药物水平取决于anti-IIa化验,auc为牛和猪的肝素治疗动物被计算为108.5±24.2,108.1±23.5 U *分* ml−1,分别。
图8。药效学的影响100 anti-Xa U /公斤肝素静脉注射剂量的牛和猪。牛和猪被注射静脉注射组的灵长类动物(n= 4 /肝素)。使用anti-Xa血浆肝素浓度决定(一)和anti-IIa(B)化验报告平均数±标准差。
讨论
尽管口头上的发展,具体因素Xa和凝血酶抑制剂,肝素和低分子量衍生品仍然至关重要的药物预防和治疗血栓性疾病的(1)。尽管bovine-derived肝素仍在使用在一些国家由于文化消费限制porcine-derived材料(25),牛海绵状脑病在1990年代爆发导致猪的独家使用肝素在西方国家。2007 - 2008的肝素污染危机需要集中关注多样化肝素供应链。牛肝素的重新引入美国市场被美国食品及药物管理局作为手段来防止供应中断(5)。
它建立了牛肝素具有抗凝血活性低于猪肝素(9,13,14,25,26)现代分析技术显示这将活动的牛肝素钠与硫酸盐化作用模式和存在的差异antithrombin-binding区域(6,12,13,27,28)。即使现代改良肝素的制造过程,牛肝素钠的效价可能会限制在~ 75%猪的肝素。试图绕过这个限制包括磺化和分馏的牛肝素(13,14)。还有待观察这些过程是否在经济上可行。
管理大量牛肝素的重量,从而管理大量的抗凝活性相似,可能有必要促进临床验收和使用肝素来自两个不同的来源。它最近表明,使用依诺肝素的第六届国际标准,这是一个猪的肝素,适用于评估效能的牛肝素(29日)。在目前的研究中,我们利用了USP标准肝素活动正常化牛和猪的肝素的浓度在体外抗凝血活性的评估,这些肝素使用的剂量在活的有机体内模型。
与先前的报道一致(9,13,14,25,26),结果表明:牛肝素研究表现出低anti-Xa和anti-IIa效能(大约130 U / mg)相比,猪的肝素(~ 185 U /毫克)。我们的数据表明,这减少了牛肝素的效力与减少抗凝血和抗血栓形成的出血性在动物模型的影响。补充或管理这些肝素在等效anti-Xa浓度或剂量最小化这些差异。这是清楚地看到在药效学研究在灵长类动物进行浓度与时间曲线重合了牛和猪的肝素注射剂量的100 anti-Xa U /公斤。这些发现支持一个小的临床研究的结果,接受心脏搭桥手术的患者被随机分配接受牛粘膜肝素或标准猪肝素(30.)。在这项研究中,总剂量的牛和猪的肝素的单位不同~ 2%和病人表现出类似的拖长某个激活凝血时间和术后失血。
上述趋势异常与鱼精蛋白中和。在体外,结果表明,在固定剂量鱼精蛋白,更多的剩余anti-Xa和anti-IIa活动(中和)观察牛肝素。这与以前的结果一致(29日),这是证明1毫克的鱼精蛋白沉淀能更大数量的猪牛肝素相比,肝素的活动。相同的研究表明,有一个更大数量的剩余(non-neutralized)活动在牛肝素治疗等离子体相比,等离子体猪肝素治疗血浆,测定肝素的活性时使用aPTT, AT-dependent anti-Xa和anti-IIa HC-II-dependent anti-IIa化验。目前正在进行研究,以确定在多大程度上这些差异存在在活的有机体内后管理鱼精蛋白对动物实际上与牛或猪的肝素。在这项研究中,戈麦斯(30.),剂量鱼精蛋白让患者服用牛肝素是数值,但不显著,高于猪heparin-treated病人的剂量。虽然看来管理牛和猪在activity-basis肝素可能是一个有前途的方法,允许交换这些药物,重要的是要记住,效能评估肝素只描述antithrombin-mediated活动。肝素链缺乏antithrombin-binding pentasaccharide仍然能够抑制凝血酶通过肝素辅因子II,可以释放活性。它已经表明,在效力确定为猪的肝素使用和HC-II-dependent化验是可比的,牛肝素展览HC-II-anti-IIa效力高于AT-anti-IIa效力(165 IU / mg vs 107 IU /毫克)(29日)。两种影响可能会增加总体数量的由牛肝素抗凝活动。使用肝素的一个安全问题是开发肝素诱发的血小板减少症。它已经表明,特定比率的肝素血小板因子4需要产生抗原复合物(31日)。equi-unit基础上牛和猪的肝素会导致不同循环摩尔浓度的牛和猪的肝素,可能会导致不同的抗原性。初步数据使用一个在体外血小板聚集试验表明,牛和猪的肝素可引起类似水平的血小板聚集的血清,他们这样做在不同的浓度范围(数据没有显示)。这样的发现可能与血小板因子4之间形成的配合物的大小和牛或猪的肝素。最近的一项研究利用光子相关光谱和zeta上浆技术表明,牛肝素粘膜形成较小的复合物与血小板因子4比猪肝素等效血小板因子4:肝素钠摩尔比率(32)。文献尚不清楚是否牛肝素表现出不同抗原性比猪肝素注射人类患者(33,34)。
这些初步研究表明anti-Xa效力相当于剂量的牛和猪粘膜肝素可能出现类似的抗凝剂,抗血栓和出血的效果。进一步的研究在活的有机体内中和anti-Xa效力将剂量的牛和猪粘膜肝素是必要的。
作者的贡献
WJ、DH和摩根富林明导致的概念和设计研究。房颤,正义与发展党、FS、虚拟现实、锰、RL, OI进行实验室分析。WJ写了初稿的手稿。WJ DH, JW,摩根富林明定稿提交版本的手稿。
资金
这些研究都支持通过资助从亲属大师工业Quimicas, WJ帕苏风杜、巴西。
利益冲突声明
WJ获得研究经费从亲属大师工业Quimicas,帕苏风杜,巴西。
其余作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。
确认
作者要感谢的努力Atul Laddu,医学博士,博士,格鲁吉亚血栓论坛的创始人,在教育学生关于血栓形成和促进学生的参与(VR、锰、RL)血栓形成的研究。
引用
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关键词:肝素,效力,牛,猪,药物动力学
引用:Jeske W, Kouta, Farooqui席迪圭F, Rangnekar V, Niverthi M, Laddu R, Hoppensteadt D,伊克巴尔O, Walenga J和法里德·J(2019)牛粘膜肝素与肝素猪粘膜在USP力量调整水平。前面。地中海。5:360。doi: 10.3389 / fmed.2018.00360
收到:2018年9月21日;接受:2018年12月13日;
发表:2019年1月09年。
编辑:
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*通信:沃尔特·Jeskewjeske@luc.edu