建设一个羊驼免疫抗体库的选择nanobodies对黑腹果蝇蛋白质

对秋 ^{1 *},杰李¹, 张甄¹, Shirui董 ¹,小梅凌¹, 方正式开始 ²,Quanshou凌^{1 *}和 黄主任朱之鑫 ^{1 *}

• ¹医学研究中心,广东第二个省级综合医院,中国
• ²生物安全实验室,广东第二个省级综合医院,中国

黑腹果蝇是发育生物学研究的模式生物和人类神经疾病。Nanobodies变量域的重链骆驼科重链抗体和抗原(vhh)与高亲和力和应用基础研究,类似传统的抗体。此外,nanobodies作为功能化抗体或蛋白质绑定在果蝇研究中已经成为一个额外的有价值的方法。在这项研究中,我们构造了一个免疫VHH图书馆对果蝇胚胎蛋白质的能力3×107。从这个图书馆,nanobodies反对三种果蝇蛋白质,Myc, CyclinE,和CG7544丰富和筛选噬菌体展示技术和酶联免疫吸附试验。CyclinE,最丰富的高亲和性nanobodies反对Myc和CG7544被发现和命名A8, N3,分别和C4。获得的这些nanobodies的DNA序列,然后克隆到表达大肠杆菌SS320 pADL-10b-Flag-His。纯化A8, N3, C4绑定相应抗原酶联免疫吸附试验和体外表面等离子体共振。这些nanobodies准备进一步调查和应用程序在果蝇的研究。总之,我们报告的可用性免疫VHH图书馆和高效nanobodies平移策略对其他蛋白质在果蝇。